《博物馆奇妙夜》讲述了纽约自然历史博物馆的夜间警卫拉里·戴利（本·斯蒂勒饰）在入职后经历的奇幻故事。博物馆中陈列的展品在夜晚会神奇地复活：罗斯福总统的蜡像（罗宾·威廉姆斯饰）成为他的导师，罗马皇帝、匈奴王、穴居人、西部牛仔等历史人物纷纷活跃起来，甚至恐龙骨架和非洲动物标本也恢复了生机。拉里必须学会管理这些混乱的局面，防止展品们互相争斗或逃出博物馆。在罗斯福和其他展品的帮助下，他逐渐理解了历史与生命的价值，并赢得了儿子的尊重。影片通过幽默奇幻的方式，展现了历史与现实的碰撞，以及一个平凡父亲在非凡境遇中的成长。